IRMM-311 地衣芽孢桿菌基因組標(biāo)準(zhǔn)品樣品描述每個小瓶包含一個瓊脂糖插入的地衣芽孢桿菌DSM 5749未消化的基因組DNA，用于PFGE。

本CRM旨在用于PFGE公司授權(quán)的益生菌飼料添加劑地衣芽孢桿菌DSM 5749的分類鑒定。所有程序中均應(yīng)使用分子生物學(xué)級（無菌、無DNA酶、RNA酶）消耗品和生物化學(xué)物質(zhì)。

用SfiI限制性內(nèi)切酶消化瓊脂糖插入物

-將IRMM-311的瓊脂糖插入物轉(zhuǎn)移到含有1 mL 10 mmol/L Tris-HCl緩沖液(pH 7.6)的1.5 mL試管中，并在室溫下孵育30 min。

-取出溶液，再加入1 mL 10 mmol/L Tris-HCl緩沖液(pH 7.6)，在室溫下再次孵育30 min。

-在不破壞插頭的情況下刪除解決方案。

-在室溫下插入兩次30 min的0.5 mL RE緩沖液中(使用RE和制造商選擇的適當(dāng)緩沖液)。更新中間位置之間的限制緩沖區(qū)。

-刪除限制性緩沖區(qū)。

-添加到每個插入物：30μL 10×濃縮SfiI緩沖液，30 U SfiI，添加水到最終體積為300μL。

-在50°C下孵育15-17小時。

-小心除去溶液，加入1 mL ES溶液（0.5MEDTA pH 8.0,1%（m/v）月桂酰肌氨酸鈉）。

-在50下孵育過夜°C.

-取出溶液，加入250μL ESP(含蛋白酶K的ES，1 mg/mL)。

-在50時孵育2小時°C.-稀釋三硼酸鹽-EDTA(TBE)緩沖液(89 mmol/L三硼酸鹽，2 mmol/L EDTA，pH 8.3)，例如SigmaT7527，與體積比為1：3的蒸餾水（緩沖液：水）。

-除去溶液，加入1 mL稀釋的TBE緩沖液，在室溫下孵育1小時。插入物可以在4°C中保存幾天。

-取每個PFGE標(biāo)準(zhǔn)品D2291和D2416的1 mm瓊脂糖插入片，在1 mL稀釋的TBE中室溫孵育1小時。

存儲

IRMM-311 地衣芽孢桿菌基因組標(biāo)準(zhǔn)品樣品在使用前應(yīng)存儲在4°C下。然而，歐盟委員會不能對在客戶的場所儲存材料期間發(fā)生的變化負(fù)責(zé)，特別是對打開的樣品。

東莞市百順生物科技有限公司是ERM的代理商，負(fù)責(zé)ERM標(biāo)準(zhǔn)品在國內(nèi)的產(chǎn)品銷售。

訂購須知：

1.本公司僅提供ERM標(biāo)準(zhǔn)品代理采購業(yè)務(wù)。

2.本公司承諾所采購產(chǎn)品來自ERM。

3.本公司保證全程采用要求的運(yùn)輸條件進(jìn)行產(chǎn)品運(yùn)輸。

4.本公司對所委托進(jìn)口產(chǎn)品品質(zhì)不做任何擔(dān)保，如遇質(zhì)量問題，本公司可協(xié)助客戶與ERM進(jìn)行協(xié)商處理售后問題。